Resumen En semen de mamíferos, se ha demostrado que la viscosidad influye de manera negativa para su conservación. En semen de aves los estudios sobre las características físicas de los eyaculados son limitados, particularmente la viscosidad no ha sido estudiada. Los medios para la criopreservación, no consideran la viscosidad para mantener la viabilidad espermática. Por lo cual, el objetivo de este estudio fue evaluar el efecto de la viscosidad en el medio para mantener su viabilidad post descongelación. Se determinó los parámetros de evaluación básica, de maduración y reacción acrosomal evaluando la presencia y distribución de Ca2+ mediante la co-incubación con clortetraciclina. Se realizaron 25 evaluaciones de pool seminal, criopreservados en medio Lake suplementado con 6 % de dimetilacetamida y con 0 % (Testigo), 10 %, 30 % y 45 % de ficoll, para ajustar la viscosidad del medio a condiciones similares a las del semen y del líquido oviductal y a un grado mayor de viscosidad. La movilidad espermática fue menor (P(0.05) en alícuotas con mayor porcentaje de ficoll. El porcentaje de espermatozoides vivos fue similar (P>0.05) en el testigo y todas las alícuotas con diferente porcentaje de ficoll. La maduración espermática presentó un mayor (P(0,05) porcentaje de espermatozoides no capacitados cuando se utilizó 10% de ficoll. De manera inversa el porcentaje de espermatozoides con reacción acrosomal fue menor (P(0,05) también cuando se utilizó 10 % de ficoll. Los resultados de este estudio demuestran que variaciones en el grado de viscosidad del medio, pueden mantener o incrementar la viabilidad espermática post descongelación.

Abstract In mammalian semen, viscosity has been shown to have a negative influence on its conservation. In bird semen, studies on the physical characteristics of ejaculates are limited, particularly viscosity has not been studied. The media for cryopreservation do not consider viscosity to maintain sperm viability. Therefore, the objective of this study was to evaluate the effect of viscosity on the medium to maintain its viability after thawing. The parameters of basic evaluation, maturation and acrosome reaction were determined, evaluating the presence and distribution of Ca2+ through co-incubation with chlortetracycline. Twenty-five (25) evaluations of seminal pool were performed, cryopreserved in Lake medium supplemented with 6 % dimethylacetamide and with 0 % (Control), 10 %, 30 % and 45 % ficoll, to adjust the viscosity of the medium to conditions similar to those of semen and oviductal fluid and to a higher degree of viscosity. Sperm motility was lower (P(0.05) in aliquots with a higher percentage of ficoll. The percentage of live spermatozoa was similar (P>0.05) in the control and all aliquots with different percentage of ficoll. Sperm maturation presented a higher (P(0.05) percentage of non-capacitated spermatozoa when 10 % ficoll was used. Conversely the percentage of spermatozoa with acrosome reaction was also lower (P(0.05) when 10 % ficoll was used. The results of this study show that variations in the degree of viscosity of the medium can maintain or increase sperm viability after thawing.

Abstract Nowadays, the third part of parrots in the world is endangered or vulnerable; an alternative for their preservation is assisted reproduction in captivity through hormonal manipulation. In birds, GnRH is the main hormone which controls reproductive physiology, it is known there are three types: GnRH-I, GnRH-II and GnRH-III, involved in the release or inhibition of luteinizing hormone and follicle stimulant hormone to control gonadal and gametic development. The objective of this study was, to evaluate the effect of administrating synthetic GnRH-I in the testicular development of Melopsittacus undulatus. Twenty-eight adult budgerigars were randomly divided in two groups: control (n=14) and treated (n=14) with a unique dose of synthetic GnRH-I. Testicular development was assessed through ultrasonography and density was evaluated with pixels. Germinal diameter and thickness of germinal epithelium were determined with histology; there were identified and countified different cellular strains in seminiferous tubules therefore spermatobioscopy. Results. Ecographic density was: control group: 76 ± 7 pixels, treated group 41 ± 3 pixels. Thickness of germinal epitellium, 51.5 ± 2.9µm and 73.1 ± 3.1µm, for control group and treated group respectively. Sperm concentration in the treated group was 300% superior than in control group. It is concluded that the administration of synthetic GnRH-I, is a viable alternative to be used as part of the assisted reproductive techniques to induce reproduction.

SUMMARY: It is important to know the morphological changes that occur in the spermatozoa of rooster during their passage through the reproductive tract, which help to understand what they acquire their fertilization capacity. The morphophysiological changes related to the capacitation and acrosomal reaction processes in the different segments of the rooster reproductive system were analyzed. Samples were obtained from various regions of the rooster reproductive tract and dorso-ventral massage to obtain ejaculates, 25 roosters were used Rhode Island Red with proven fertility, assessments were performed with chlortetracycline and Lectin WGA-FITC to determine the morphophysiological parameters. Sperm motility increases (p<0.05) during the passage of spermatozoa from the testis until they are ejaculated. The parameters of viability and morphology also show differences (p<0.05) in the different segments of the tract. Sperm morphometry shows a spermatic contraction (p<0.05) in the cranial and medial segments of the vas deferens. The acrosomal reaction capacity evaluated with chlortetracycline (CTC) or Wheat germ agglutinin (WGA), was evident increasing the parameters (p<0.05) with the use of the perivitelline layer in the spermatozoa of the reproductive tract and of the ejaculate. Spermatozoa of the reproductive tract of the rooster demonstrate acrosomal reaction capacity without requiring a previous sperm capacitation condition. On the other hand, they do not show parameters of incapacity, which implies that they cannot be stored in any segment of the reproductive tract.

RESUMEN: Es importante conocer los cambios morfológicos que se producen en los espermatozoides del gallo durante su paso por el tracto reproductivo y que ayudan a comprender como adquieren su capacidad de fertilización. Se analizaron cambios morfofisiológicos relacionados con los procesos de capacitación y reacción acrosomal de los espermatozoides presentes en los diferentes segmentos del tracto reproductor del gallo. Se obtuvieron espermatozoides de diferentes regiones del tracto reproductor del gallo y de espermatozoides de eyaculado. Se usaron 25 gallos Rhode Island Red con fertilidad probada. Se realizaron evaluaciones básicas, con clortetraciclina (CTC) y lectina Wheat germ agglutinin conjugada con isotiosionato de fluoresceína (WGA-FITC) para determinar los parámetros morfofisiológicos. La motilidad del esperma aumenta (P<0,05) durante el paso de los espermatozoides desde el testículo hasta que son eyaculados. Los parámetros de viabilidad y morfología también muestran diferencias (P <0,05) en los diferentes segmentos del tracto. La morfometría mostró una contracción de los espermatozoides (P<0,05) en los segmentos craneal y medial del conducto deferente. La capacidad de reacción acrosomal evaluada con clortetraciclina CTC o WGAFITC, fue evidente al aumentar los parámetros (P<0,05) con el uso de membrana perivitelina en los espermatozoides del tracto reproductivo y del eyaculado. los espermatozoides del tracto reproductivo del gallo demuestran capacidad de reacción acrosomal sin requerir una condición previa de capacitación espermática. Por otro lado, no muestran parámetros de descapacitación espermática lo que implica que no pueden almacenar en ningún segmento del tracto reproductivo.

This study was set out to: i) characterize the morphometry of spermatozoa of M. sanctaefilomenae; and ii) evaluate the effect on the quality of semen by astaxanthin supplementation in the diet. The morphometry of the sperm was analyzed by optical microscopy (nigrosin-eosin staining). Semen quality of 360 fish was evaluated by spermograms (volume, total number, motility and viability). The length of the sperms was 16.83 ± 2.33 μm, the head diameter was 1.93 ± 0.21 μm without acrosome, the midpiece diameter was 0.91 ± 0.23 μm and the length of the flagellum was 13.18 ± 1.76 μm. In fish unexposed to astaxanthin (control group) the seminal volume and the total number of sperms was 2.14 ± 1.55 μL and 6.8x10(8) ± 29, respectively. The addition of astaxanthin in the diet significantly increased (P < 0.05) these parameters to 3.87 ± 1.06 μL and 13x10(8) ± 26, respectively. The motility of the sperms and the sperm viability did not differ between both groups (P > 0.05). The results suggest that astaxanthin improves some parameters of the semen quality (volume and total number). This improvement may be attributable to the antioxidant properties (i.e., protection against oxidative stress in testicular cell structures) of astaxanthin.

Se caracterizó la morfometría de los espermatozoides del teleósteo Moenkhausia sanctaefilomenae, y se evaluó el efecto de la suplementación del carotenoide astaxantina en la dieta sobre la calidad de semen. La morfometría de los espermatozoides se realizó con microscopia óptica con la tinción de eosina-nigrosina vista en fluorescencia. La calidad de semen de 360 peces se evaluó con espermogramas clásicos (concentración, volumen, motilidad y viabilidad). La longitud total del espermatozoide fue de 16,83 ± 2,33 μm, diámetro de la cabeza sin acrosoma de 1,93 ± 0,21 μm, diámetro de la pieza media de 0,91 ± 0,23 μm y longitud del flagelo de 13,18 ± 1,76 μm. En los peces del grupo control, el volumen seminal y la concentración espermática fue de 2,14 ± 1,55 μL y 6,8x10(8) ± 292,82 respectivamente. La adición de astaxantina incrementó significativamente (P < 0,05) estos parámetros a 3,87 ± 1,06 μL y 13x10(8) ± 265,56 respectivamente. La motilidad no varió significativamente entre el grupo control (3,14 ± 1,46) y astaxantina (3,50 ± 0,92). Los resultados indicaron una tendencia hacia el incremento de la calidad seminal en el grupo tratado con astaxantina. Este incremento se puede atribuir a sus propiedades antioxidantes que protegen a las células testiculares contra el estrés oxidativo, con lo cual, se mejora el potencial reproductor de esta especie en condiciones de cultivo.

El objetivo del presente estudio fue conocer las características de los gametos de Puntius tetrazona (n=240), los cambios morfológicos a partir de su activación mediante espermogramas cásicos y por otro lado, se evaluó la implementación de la fertilización in vitro a partir de la tasa ovulatoria, el % de fertilización y eclosión y el número de larvas vivas a las 72h. El volumen promedio de semen fue de 3.0±0.7µL. La concentración espermática mínima, máxima y promedio fue 44.48x10(6)spz/mL, 52.3x10(6)spz/mL y 48.1±5.9x10(6)spz/mL, respectivamente. La viabilidad promedio fue de 84.68±3.27%. La motilidad promedio fue 81.53±2.28%. El diámetro de los espermatozoides fluctuó entre 2.16±0.2 y 2.79±0.3µm; 3.84±0.3 y 4.86±0.31µm sin y con contacto con el agua respectivamente, con diferencias significativas. El diámetro mayor fue a los 30s en contacto con el agua. Los ovocitos de menor y mayor diámetro se registraron a los diez y 30s sin y con contacto con el agua respectivamente. Los diámetros de los ovocitos en diez y 30s en contacto con el agua fluctuaron entre 1.11 y 1.55mm respectivamente. La mayor tasa ovulatoria fue en la fertilización in vitro con 250±50 ovocitos frente a 28±09 de la natural, con diferencias significativas. Los porcentajes de fertilización y eclosión fueron más elevados en la fertilización natural con 80% y 60% respectivamente. Se registraron 75±18 larvas a las 72 horas en el grupo in vitro comparado con 13.4±12 larvas de la fertilización natural. Con lo anterior, la técnica que permitió mayor cantidad de larvas fue la de fertilización in vitro.

The production of ornamental fishes represents an economic activity of a growing number of Mexican families. Nevertheless, the reproduction of fish in captivity is one of the complications faced by farmers. This study was set up to: (i) evaluate the morphological and functional changes induced by hydration in the gametes of fish tiger barb (Puntius tetrazona; 240 samples) at tree times after hydration (10, 20 and 30s) with classic spermograms (volume, sperm concentration, viability, motility, and normal morphology); and (ii) evaluate the implementation of in vitro fertilization based on the ovulation rate, the percentage of fertilization and hatching, and the larval numbers obtained after 72 hours. The average volume of milt was 3.0±0.7μL, and the minimum, maximum and average concentration of sperm was 44.4x10(6) spz/mL, 52.3x10(6)spz/mL, and 48.1±5.9x10(6)spz/mL, respectively. The viability and motility of the sperm was 84.6±3.2% and 81.5±2.2%, respectively. The diameter of the sperm with/without water contact was 2.1±0.6μm and 3.8±1.0μm (p<0.05); the largest diameter was recorded 30 seconds after the contact with water. For oocytes, the smaller and larger diameters were recorded at 10 and 30s, respectively (both with/without water contact); the oocytes diameters after 10 and 30 seconds of contact with water were 1.11 and 1.55mm, respectively. A higher ovulation rate was recorded using the in vitro fertilization: 250±50 oocytes versus 28±09 oocytes (during natural fertilization; p<0.05). Nevertheless, fertilization and hatching rates were higher for the natural fertilization (80 and 60%, respectively). Considering the number of larvae obtained after 72 hours, our results showed a higher value for the in vitro fertilization (75±18 compared to 13.4±12 of the natural fertilization; p<0.05). We propose this fish as a model for other ornamental fishes of commercial interest. Our results demonstrate that the in vitro fertilization is a very high viable option to optimize and maximize resources; besides, the reproduction management optimization under controlled conditions may enhance wild fish stocks preservation. Rev. Biol. Trop. 62 (4): 1353-1363. Epub 2014 December 01.

Most of the neotropical bats reproduce in a seasonal fashion. The purpose of this study was to assess changes in testicular tissue by morphometry, in Tadarida brasiliensis bat, in a south urban zone of Mexico City during summer, autumn, and winter. Three sample collections (February, June, and September) from T. brasiliensis were carried out (n=6). Testicle fragments were obtained for histological studies. Diameter of the seminiferous tubules and interstitial space were measured, cellular populations were identified and counted. June samples showed smaller diameter of seminiferous tubules and larger interstitial space between tubules; also there were less number of germinal epithelium cells and spermatids were absent. Tissues from September and February showed a significant increase (p 0.05) in tubule diameter, germinal epithelium thickness, and number of germinal epithelium cells when compared to June samples. Only February samples showed presence of spermatids. Our results suggest the existence of seasonal variations in the reproductive activity of T. brasiliensis, under conditions in which the study was conducted.

La mayoría de los murciélagos neotropicales se reproducen de manera estacional. El objetivo de este estudio fue determinar los cambios morfométricos en el parénquima testicular del murciélago Tadarida brasiliensis que habita en un área urbana del sur de la Ciudad de México durante las estaciones de verano, otoño e invierno. Se obtuvieron fragmentos de tejido testicular para su estudio histológico. Se midió el diámetro de los túbulos seminíferos y el espacio interstisial y se identificaron y contaron distintos tipos celulares. En las muestras de junio se encontró un menor diámetro de los túbulos seminíferos y un mayor espacio intersticial entre los túbulos; también hubo un menor número de células del epitelio germinal y no hubo presencia de espermátides. En las muestras de tejido obtenidas en el mes de septiembre y febrero se observó un incremento significativo en el diámetro del túbulo, grosor del epitelio germinal y número de células del epitelio germinal cuando fueron comparadas con las muestras de junio (p 0.05). Solo en las muestras de febrero hubo presencia de espermátides. En conjunto, nuestros resultados sugieren la existencia de variaciones estacionales en la actividad reproductiva de T. brasiliensis, bajo las condiciones en que se realizó el estudio.

The quality of the spermatozoa obtained from canine epididymis tail before and after being cryopreserved at 3, 24, 48 and 72 hours postmortem was evaluated. The sperm was obtained by orchiectomy of sacrificed canines, which after dissection of the epididymis, the sperm was collected by retrograde flow with the diluent Andersen. The progressive motility, viability and acrosomal integrity were evaluated in the samples obtained before and after being cryopreserved at -196°C in liquid nitrogen. The results showed that the average number of spermatozoa with progressive motility decreased significantly (p<0.05) after 48 hours, when values of 70.45±5.88 and 25.85±4.04, postmortem and post-thawed respectively, were obtained. The live spermatozoa also decreased significantly (p<0.05) to obtain percentages of 92.35±1.78 at 3 hours, to of 79.95±3.48 at 24 hours, to 60.75±6.73 at 48 hours and 58.45±3.37 at 72 hours. Likewise, the averages of live spermatozoa at thawing decreased significantly (p<0.05), where the the percentages of live spermatozoa were 73.30±4.64 at 3hours, 61.75±5.46 at 24 hours, 48.95±5.15 at 48 hours and 29.75±5.8 at 72 hours. Finally, the acrosomal integrity was significantly reduced (p<0.05) with the best results observed until the 24 hours, 78.05±4.57 and 61.95±4.55 for post-thawing and postmortem, respectively. It was concluded that the extraction technique with the diluent used and freezing allows a favorable postmortem recovery of sperm from epididymis tail of dogs.

Con el objetivo de evaluar la calidad de espermatozoides obtenidos de cola de epidídimo de caninos, antes y después de ser criopreservados, a 3, 24, 48 y 72 horas postmortem, se obtuvieron los mismos, mediante orquiectomía de caninos sacrificados, a los cuales se les realizó la disección del epidídimo y mediante flujo retrogrado con el diluyente Andersen se recolectaron los espermatozoides. A las muestras obtenidas se les evaluó la movilidad progresiva, viabilidad e integridad acrosomal antes y después de ser criopreservadas a -196°C en nitrógeno líquido. Los resultados muestran que el promedio de espermatozoides con movilidad progresiva va decreciendo significativamente (p<0.05) después de las 48 horas donde se obtiene un 70.45±5.88, 25.85±4.04 postmortem y postdescongelado, respectivamente. Para los espermatozoides vivos también va disminuyendo de manera significativa (p<0.05) obteniendo un porcentaje de 92.35±1.78 a las 3 horas, a las 24 horas de 79.95±3.48; a las 48 horas de 60.75±6.73 y a las 72 horas de 58.45±3.37. Asimismo el promedio de espermatozoides vivos al descongelar fue disminuyendo de manera significativa (p<0.05), a las 3 horas 73.30±4.64 de espermatozoides vivos, a las 24 horas 61.75±5.46, a las 48 horas 48.95±5.15 y a las 72 horas 29.75±5.8. Por último la integridad acrosomal obtuvo una disminución con diferencia significativa (p<0.05) encontrando los mejores resultados postmortem y postdescongelado hasta las 24 horas 78.05±4.57, 61.95±4.55. Se concluye que la técnica de extracción con el diluyente utilizado, así como la congelación son favorables para la recuperación de espermatozoides de cola de epidídimo de perros postmortem.